Prospecção de antimicrobianos de actinomicetos isolados do trato intestinal de besouros (Insecta: Coleoptera)

Abstract

Microbial resistance is a global problem and consequently it is necessary to intensively search for new antimicrobial and antifungal agents from natural sources, through the exploration of new niches and habitats. The beetles of the Passalidae family live and feed on decaying wood and their intestines are richly colonized by different microorganisms. Actinomycetes represent one of the important classes of bacteria for their ability to produce a wide range of secondary metabolites. 103 strains of actinomycetes were isolated. Moving on to the preliminary antimicrobial activity tests with the agar diffusion method, the top five being selected for further testing. Liquid fermentations were carried out with casein starch broth and CZAPEC and solid medium with potato-dextrose and starch agar. At the end of the fermentation processes, the cultures were subjected to extraction in ethyl acetate, obtaining the crude extracts, the material was filtered, concentrated and dried, and the yields were calculated. The extracts were analyzed for antimicrobial and antifungal activity and for the minimum inhibitory concentration using the microdilution technique. CCD thin layer chromatography was performed in the chloroform methanol ratio (70:30) to assess the complexity of the samples. Then the crude extract of the BA16.2.1 strain was selected as the most promising and proceeded to purification and isolation of active fractions in preparative HPLC in MS/MS. Through this study it is expected to obtain active and identified fractions regarding their antimicrobial and antifungal activity. Keywords: Passalidae beetles; Actinomycetes; Antimicrobian activity.

La resistencia microbiana es un problema global y, en consecuencia, es necesario buscar intensamente nuevos agentes antimicrobianos y antifúngicos de fuentes naturales, mediante la exploración de nuevos nichos y hábitats. Los escarabajos de la familia Passalidae viven y se alimentan de madera en descomposición y sus intestinos están ricamente colonizados por diferentes microorganismos. Los actinomicetos representan una de las clases importantes de bacterias por su capacidad para producir una amplia gama de metabolitos secundarios. Se aislaron 103 cepas de actinomicetos. Pasando a las pruebas preliminares de actividad antimicrobiana con el método de difusión en agar, se seleccionaron los cinco primeros para realizar más pruebas. Las fermentaciones líquidas se realizaron con caldo de caseína-almidón y CZAPEC y en medio sólido con patata-dextrosa y agar almidón. Al finalizar los procesos de fermentación, los cultivos se sometieron a extracción en acetato de etilo, obteniendo los extractos crudos, el material se filtró, concentró y secó, y se calcularon los rendimientos. Se analizó la actividad antimicrobiana y antifúngica de los extractos y la concentración inhibitoria mínima mediante la técnica de microdilución. La cromatografía de capa fina CCD se realizó en la relación cloroformo metanol (70:30) para evaluar la complejidad de las muestras. Luego se seleccionó el extracto crudo de la cepa BA16.2.1 como el más prometedor y se procedió a la purificación y aislamiento de las fracciones activas en HPLC preparativa en MS/MS. A través de este estudio se espera obtener fracciones activas e identificadas en cuanto a su actividad antimicrobiana y antifúngica. Palabras llave: Escarabajos Passalidae; actinomicetos; Actividad antimicrobiana.