@MASTERSTHESIS{ 2021:1253871752, title = {Diagn?stico viral e limpeza clonal de matrizes de maracujazeiro (Passiflora edulis Sims) utilizadas na produ??o de sementes h?bridas}, year = {2021}, url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8170", abstract = "Este trabalho teve por objetivo realizar o diagn?stico viral e a limpeza clonal de matrizes de maracujazeiro (Passiflora edulis Sims) utilizadas na produ??o de sementes h?bridas. Para a realiza??o do diagn?stico viral, folhas dos gen?tipos CPMSC1, CPGA1, MR1, CPMGA2 e CPF1SSBR foram coletadas e o RNA e DNA extra?dos para a detec??o viral por RT-PCR e PCR, utilizando primers que codificam regi?es gen?micas de Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), Lettuce chlorosis virus (LCV) e Begomovirus. Complementarmente, os resultados obtidos para os primers de CABMV foram hibridizados por Southern blot para um diagn?stico mais confi?vel. Os resultados revelaram a presen?a de CABMV em 100% das amostras de todas as matrizes testadas. Al?m disso, amostras de CPGA1 (17%) e de CPMSC (11%) foram positivas utilizando os primers universais de begomov?rus. Nenhuma amostra foi positiva para LCV. Num segundo experimento, um protocolo para a micropropaga??o dos gen?tipos foi desenvolvido, visando a posterior multiplica??o das matrizes oriundas da limpeza clonal. Para tanto, inicialmente foi avaliado o melhor explante para a fase de o estabelecimento e multiplica??o in vitro. Verificou-se que o desenvolvimento de gemas preexistentes foi observado apenas nas microestacas, em rela??o ? inocula??o de gemas isoladas, gerando brotos com tamanho m?dio de 7 mm ap?s 45 dias de cultivo. Em seguida, apenas as microestacas foram utilizadas em novo experimento para o estabelecimento in vitro em meio de MS acrescido de 4,43 ?M de BAP. Nele, observou-se o desenvolvimento de brotos com pelo menos 6 mm ap?s 30 dias de cultivo. O material proveniente destas microestacas foi utilizado para os demais experimentos de multiplica??o, alongamento e enraizamento. Por fim, para testar a efici?ncia da cultura de ?pices caulinares na elimina??o do CABMV nas matrizes previamente diagnosticadas, ?pices caulinares (0,1 - 0,3 mm) foram isolados e inoculados em meio de MS acrescido de 0,05 ?M de ANA, 0,44 ?M de BAP e 0,28 ?M de AG3. Ap?s a regenera??o do meristema apical, os explantes foram transferidos para meio de MS acrescido de 4,43 ?M de BAP para indu??o de prolifera??o de gemas e multiplica??o. Agregados de gemas provenientes da cultura de ?pices caulinares foram utilizados para indexa??o do material vegetal para o v?rus CABMV por meio de RT-PCR. Os resultados observados demonstraram diminui??o na intensidade das bandas referentes ao CABMV nos gen?tipos CPGA1, MR1 e CPMGA2, indicando diminui??o de carga viral. Por fim, a limpeza viral foi observada em apenas uma amostra do gen?tipo CPGA1.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }