@MASTERSTHESIS{ 2021:1332746860, title = {Desenvolvimento de rea??o de qPCR para detec??o de H. capsulatum em amostras de solo de grutas e cavernas do Munic?pio de Presidente Figueiredo}, year = {2021}, url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8303", abstract = "Histoplasma capsulatum ? um fungo encontrado no ambiente que causa uma micose profunda, que se apresenta de forma assintom?tica ? disseminada. Na forma disseminada acomete principalmente pacientes com AIDS. Na Am?rica do Sul, essa enfermidade ? uma das tr?s principais que levam o paciente com AIDS a ?bito. Apesar destes fatos poucos estudos avaliaram sua distribui??o ambiental. Este estudo teve como objetivo o desenvolvimento de rea??o de qPCR para detec??o de H. capsulatum em amostras de solo de grutas e cavernas do Munic?pio de Presidente Figueiredo. Inicialmente, foi feito um estudo in silico com software Geneious para desenvolver um primer da regi?o ITS do DNAr de H. capsulatum, em seguida o conjunto de primers e sonda foi validado com a execu??o da curva padr?o com DNA de cultura do fungo alvo, c?lculo do erro experimental, teste para verificar rea??es cruzadas com outros pat?genos e teste de sensibilidade e especificidade. Por fim, com estes primers e sonda foi feita a verifica??o da presen?a do H. capsulatum em 30 amostras de solo de 2 cavernas e 1 gruta do munic?pio de Presidente Figueiredo que tiveram seu DNA extra?do por duas metodologias distintas. Como resultados, foi desenvolvido um conjunto de primers e sonda para detec??o de H. capsulatum para uso em PCR em tempo real (qPCR) tendo como alvo a regi?o ITS do DNAr. O desenho desenvolvido demonstrou in silico ser t?o ou mais adequado que outras propostas que tinham como alvo esta mesma regi?o. O conjunto demonstrou resultados satisfat?rios quanto limite de detec??o,10 fg/?L de amostra (20 fg/rea??o), curva padr?o adequada (r2 0,97), baixo erro experimental, aus?ncia de rea??o cruzada com outros organismos patog?nicos sensibilidade e especificidade adequados. Os experimentos aplicando o novo conjunto de primers e sonda em 30 amostras de solo de grutas/cavernas do Munic?pio de Presidente Figueiredo demonstraram a presen?a de DNA de H. capsulatum em uma amostra. A proposta de qPCR ? uma nova op??o de detec??o/diagn?stico que poder? ajudar no entendimento da distribui??o ambiental do pat?geno bem como no diagn?stico cl?nico em amostras biol?gicas. A detec??o de H. capsulatum em amostra de solo de caverna do munic?pio de Presidente Figueiredo refor?a a necessidade de cuidados recomendados para o turismo na regi?o.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas}, note = {Faculdade de Ci?ncias Farmac?uticas} }