@PHDTHESIS{ 2020:1984372430, title = {Imunodiagn?stico com Beads Single e Multiplex para detec??o de anticorpos contra as prote?nas recombinantes Core, Ns3, Ns4B E Ns5A do v?rus da hepatite C}, year = {2020}, url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8309", abstract = "Introdu??o: As infec??es hep?ticas causadas por v?rus est?o entre as mais graves, com preval?ncia no mundo todo. O diagn?stico do HCV ? feito por teste sorol?gicos para triagem e testes moleculares confirmat?rios. Apesar dos testes diagn?sticos utilizados atualmente apresentarem n?veis elevados de sensibilidade e especificidade, ainda apresentam resultados falsos-negativos e positivos, al?m de apresentarem uma jornada de trabalho longa. Objetivo: Desenvolver um m?todo single e multiplex para detec??o de anticorpos contra as prote?nas recombinantes CORE, Ns3, Ns4b e Ns5a do v?rus da hepatite C, acopladas a microbeads funcionalizadas. Material e M?todos: As prote?nas recombinantes do HCV CORE, Ns3, Ns4b e Ns5a foram expressas em E. coli BL21 (DE3) pLysS e purificadas por Ni-NTA. Para realiza??o dos ensaios single e multiplex as prote?nas foram acopladas a beads magn?ticas carboxiladas. Foram utilizadas 30 amostras de soros HCV+ e 30 amostras de soros controles, para an?lise do reconhecimento de anticorpos contra as prote?nas acopladas ?s beads, pelo m?todo da citometria de fluxo. Resultados e conclus?o: As prote?nas recombinantes CORE, Ns3, Ns4b, Ns5a N-terminal e Ns5a C-terminal foram expressas com sucesso em hospedeiro E.coli e recuperadas na por??o sol?vel do extrato bacteriano utilizando coluna de n?quel. As prote?nas recombinantes acopladas em beads magn?ticas foram imunorreativas para os soros de pacientes com hepatite C cr?nica, com alta sensibilidade e especificidade. O ensaio multiplex melhorou a sensibilidade e especificidade dos testes em compara??o com os ensaios individuais.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Imunologia B?sica e Aplicada}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }