@MASTERSTHESIS{ 2018:1632771936, title = {Express?o heter?loga da prote?na FEM de abelha Melipona interrupta (Hymenoptera, Apidae) em bact?ria Escherichia coli}, year = {2018}, url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8537", abstract = "Em todo planeta ? not?ria a queda populacional das abelhas, o que tem levado cientistas do mundo inteiro a encontrar meios que auxiliem a preserva??o destes animais. A redu??o populacional tem efeito extremamente negativo para esses insetos devido ? diminui??o dos alelos de genes de determina??o de sexo. Por isso estudos que busquem a compreens?o do papel destes genes podem vir a ajudar na preserva??o desses insetos. O gene fem desempenha importante papel da determina??o de sexo e castas de abelhas. A contribui??o do gene fem para estes processos em Mellipona interrupta, uma abelha nativa da regi?o amaz?nica, tem sido investigada por m?todos de trancript?mica. Para contribuir aos resultados e hip?teses de outros autores sobre a participa??o desse gene na determina??o de sexo e casta de M. interrupta, este trabalho objetivou em expressar, purificar e renaturar a prote?na rMiFEM. O gene fem sint?tico foi clonado no vetor de express?o pGS-21a e expresso em diferentes linhagens de Escherichia coli, sendo que os melhores resultados foram obtidos na linhagem Rosetta (DE3). Os clones expressaram uma prote?na de 50 kDa (rMiFEM) na forma de corp?sculo de inclus?o seguido de renatura??o in vitro utilizando tr?s diferentes protocolos. Destes, o que proporcionou melhores resultados foi o recomendado para renatura??o de Prote?nas SR. Ao se analisar a sequ?ncia pept?dica da prote?na MiFEM com ferramentas de bioinform?tica, identificou-se um dom?nio de liga??o ao RNA que ainda n?o havia sido descrito para essa prote?na, bem como duas regi?es ricas em arginina e serina (dom?nios RS que j? haviam sidos descritos anteriormente) e v?rios poss?veis s?tios de fosforila??o. Utilizando protocolo de enriquecimento de Prote?nas SR revelou-se um padr?o diferente nas prote?nas de machos, operarias e rainhas, indicando que diferentes Prote?nas SR s?o expressas diferencialmente entre sexos e castas. Embora n?o tenha sido poss?vel verificar a prote?na Fem no extrato enriquecido, hipotetiza-se que Fem de M. interrupta foi precipitada pois apesar de n?o ser uma SR-prote?na ela cont?m os dom?nios necess?rios para a precipita??o. A prote?na rMiFEM ser? posteriormente utilizada para produ??o de anticorpos espec?ficos anti-Fem, o que auxiliar? na compreens?o da participa??o da prote?na Fem na determina??o de sexos e castas em M. interrupta.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }