@MASTERSTHESIS{ 2022:423285276,
 	title = {An?lise do uso de Bacillus subtilis como hospedeiro para express?o de VHH anti-fosfolipase de Bothrops jararacussu},
 	year = {2022},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/9229",
 	abstract = "Os Homod?meros Vari?veis de Cadeia Pesada (VHHs), tamb?m chamados de nanocorpos de camel?deos, s?o fragmentos de anticorpos IgG incomuns e exclusivos de animais da fam?lia camelidae, que atingem alta afinidade e especificidade de liga??o ao ant?geno. Atualmente s?o agentes potenciais para aplica??es no tratamento ou diagn?stico em casos de acidentes of?dicos. Diferentes hospedeiros j? produziram nanocorpos recombinantes, por?m ainda h? desafios nesta produ??o que precisam ser superados.Visando contornar estes problemas, exploramos o uso de Bacillus subtilis para a express?o de VHHs. No cap?tulo I desta disserta??o apresentamos um artigo de revis?o que inicialmente levantou os principais estudos que justificam a escolha de B. subtilis na pesquisa e nas ind?strias. Correlacionamos ?s caracter?sticas deste hospedeiro atreladas ?s variadas estrat?gias de engenharia gen?tica para produzir biomol?culas de forma eficiente e econ?mica. O cap?tulo II aborda os resultados decorrentes da utiliza??o de B. subtilis cepa KO7 como hospedeiro para produzir um VHH anti-fosfolipase. O B. subtils KO7 foi transformado com o plasm?deo pHEN1 e foi feita a posterior indu??o da express?o da prote?na, a confirma??o da express?o foi realizada pela t?cnica de western-blot e a funcionalidade da prote?na foi avalida via ensaio de citometria de fluxo. Os resultados demonstraram que a transforma??o utilizando o vetor pHEN1 foi eficiente e as indu??es utilizando o indutor IPTG ou a lactose foram satisfat?rias. A prote?na VHH foi expressa na por??o sol?vel do lisado bacteriano apresentando uma massa molecular de aproximadamente 11 KDa. Observou-se um alto reconhecimento do VHH anti-fosfolipase contra as prote?nas miot?xicas Bothropstoxina I (BthTX-I) e Bothropstoxina II (BthTX-II) de Bothrops jararacussu, constatando que B. subtilis KO7 ? um potencial hospederio para produzir VHHs sol?veis e com sua funcionalidade preservada para posterior uso cl?nico.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}