@MASTERSTHESIS{ 2009:1786892042,
 	title = {Identifica??o molecular e produ??o de enzimas celulol?ticas por Trichoderma spp},
 	year = {2009},
 	url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/2254",
 	abstract = "Trichoderma s?o fungos anam?rficos pertencentes ? classe dos hifomicetos, tamb?m
 chamados fungos imperfeitos, assexuais ou conidiais e que t?m como teleomorfo o
 g?nero Hypocrea. S?o fungos de vida livre, distribu?dos em todo o mundo e encontrados
 em solos de diversas temperaturas, especialmente naqueles que cont?m mat?ria
 org?nica. Geralmente n?o s?o considerados importantes pat?genos humanos, mas
 existem alguns relatos indicando patogenicidade ocasional em algumas esp?cies. Sua
 f?cil manipula??o e cultivo in vitro, estabilidade e viabilidade das col?nias preservadas,
 fazem desse g?nero um grande alvo para as pesquisas biotecnol?gicas. Por tais
 caracter?sticas, foram isolados Trichoderma das plantas Victoria amazonica, Rollinia
 sp., Murraya paniculata e Strychnos cogens; da madeira Scleronema micranthum,
 conhecida como cardeiro; de jatob? (Hymenaea courbaril), do solo de cultura de cubiu
 (Solanum sessiliflorum) e de terra preta de ?ndio, com o objetivo de identificar, pela
 biologia molecular, em n?vel de esp?cie, tais isolados, bem como avaliar sua capacidade
 de produ??o de enzimas celulol?ticas. Das 30 linhagens obtidas foram realizadas
 culturas monosp?ricas, as quais foram preservadas em ?leo mineral, m?todo Castellani
 e em glicerol 10%. A partir da suspens?o em glicerol, de cada amostra foi inoculado
 10?L em 20mL de BD e cultivado a 26oC, a 100 rpm por 40:00h. Em seguida foi
 extra?do o DNA gen?mico, deste realizada a PCR espec?fica para as regi?es ITS-1 e
 ITS-2 do DNA riboss?mico e posteriormente o sequenciamento. Para a produ??o de
 enzimas, os isolados foram previamente cultivados em meio indutor. Foram inoculados
 10?L da solu??o de esporos (Glicerol 10%) em 50mL de solu??o de Manachini onde o
 substrato indutor utilizado foi a carboximetilcelulose. Os fungos foram incubados a
 27?C, 120 rpm durante 120 horas. A dosagem de CMCase foi efetuada com base no
 m?todo do ?cido Dinitrosalic?lico. Para a dosagem de ?-glucosidase foi utilizado o pnitrofenil-
 ?-D-Glucopiranos?deo (pNPG) como substrato para a enzima. A concentra??o
 de prote?nas totais foi determinada pelo m?todo de Bradford, utilizando-se o reagente
 concentrado comercial da Bio-RadTM e albumina de soro bovino (ASB), como padr?o.
 O resultado da identifica??o molecular das primeiras 13 amostras nos revelaram as
 esp?cies: T. harzianum, T. koningii, T. asperellum, T. viride, T. ovaslisporum, T.
 hamatum, T. piluliferum e T. koningiopsis, com um percentual entre 96 e 99% de
 identidade e 100% de confiabilidade. Os resultados enzim?ticos para CMCase
 indicaram valores baixos, inferiores a 0,100 U/mL com exce??o de T. koningii (MPCe
 10 3.2), T. harzianum (MPCe 2 2.2a), ambos isolados de M. paniculata, e o isolado
 1437 identificado como Trichoderma sp., proveniente de terra preta de ?ndio, que
 apresentaram valores um pouco mais altos de 0,112 e 0,103 e 0,105 U/mL,
 respectivamente. Para ?-glucosidase, os resultados apresentados mostraram alta
 atividade na grande maioria dos isolados com destaque para T. harzianum MPCe 3
 3.1(10,45U/mL) e T. piluliferum Vrc 2 3.2 (9,71 U/mL). Todos os isolados produziram
 prote?nas em meio de cultura contendo carboximetilcelulose como substrato indutor",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}