@MASTERSTHESIS{ 2010:825024869,
 	title = {Sele??o dos clones produtores de amilases e proteases presentes na biblioteca Metagen?mica de Terra Preta de ?ndio},
 	year = {2010},
 	url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/3615",
 	abstract = "Na floresta Amaz?nica s?o encontrados solos agricult?veis denominado de solo de Terra Preta de ?ndio (TPI), um solo rico em mat?ria org?nica e em minerais. A biodiversidade da Amaz?nia constitui uma fonte de valor alt?ssimo de micro-organismos n?o-cultiv?veis que podem ser isolados atrav?s das constru??es das bibliotecas metagen?micas, utilizando vetores de grandes fragmentos, com o objetivo de encontrar novas enzimas biocatal?ticas. As enzimas de maior aplica??o no mercado industrial s?o as amilases e proteases, aplicadas nas ind?strias: qu?mica, farmac?utica, t?xtil, de detergentes e aliment?cia. As amilases s?o capazes de degradar o amido em unidades de sacar?deos menores, j? as proteases catalisam a hidr?lise de liga??es pept?dicas. O objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar parcialmente enzimas amilol?ticas e proteol?ticas de clones isolados a partir de uma sele??o funcional da biblioteca metagen?mica de TPI da regi?o Amaz?nica constru?da com DNA total extra?do dos micro-organismos presentes nas amostras de solos de TPI, inseridos no vetor fosmidial (pCC1Fos ) e clonado na c?lula hospedeira Escherichia coli (EPI300). De 1.344 clones pertencente a biblioteca metagen?mica, apenas 4 clones foram produtores de halo de hidr?lise de amido e 3 clones foram proteol?ticos, al?m disso, todas as enzimas produzidas pelos 4 clones amilol?ticos e 1 clone proteol?tico foram caracterizadas parcialmente. Ap?s o isolamento, os clones foram inoculados em meio de cultura Luria Bertani (LB) a 37oC, sob agita??o de 150 rpm e submetidos aos ensaios enzim?ticos nos pHs de 3 a 10 e temperatura variando de 25 a 100?C por at? 90 minutos de incuba??o. As amilases tiveram sua maior produ??o em 24 horas (4,3 U/mL) e sua atividade ?tima foi em pH neutro a levemente alcalino, o clone P1C4 demonstrou a maior produ??o a 70?C (6,93 U/mL), j? os clones P5C4 e P6C12 demonstraram a maior termoestabilidade a 80?C, tais resultados indicam que o gene de alfa-amilase clonado deve ser codificador de uma enzima termoest?vel, como por exemplo, a enzima produzida por Bacillus liqueniformis. J? o clone P3A3 produziu 26,3 U/mL de proteases em 10 horas de produ??o, sua atividade ?tima foi em pH neutro, sendo sua temperatura ?tima em 30?C (56,0 U/mL) e sua termoestabilidade foi demonstrada em 50?C (22,0 U/mL). Estas caracter?sticas contribuem para a aplica??o destas enzimas em setores industriais como na produ??o de alimentos, ind?stria qu?mica e produ??o de detergentes. As enzimas isoladas neste trabalho demonstraram caracter?sticas e atua??es novas quando comparadas a enzimas descritas atualmente, a qual comprova a efici?ncia da constru??o de bibliotecas metagen?micas para o isolamento de novos bioprodutos.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Diversidade Biol?gica},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}