@MASTERSTHESIS{ 2004:1537237952,
 	title = {Proteases de leveduras para aplica??o m?dica},
 	year = {2004},
 	url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/4052",
 	abstract = "As proteases s?o enzimas que ocupam uma posi??o central com respeito ? aplica??o na ?rea m?dico e industrial. Entre os v?rios tipos de proteases, utilizadas na ind?stria farmac?utica e de cosm?ticos, destacam-se as colagenases utilizadas para amaciamento da pele, higiene oral, na limpeza de feridas purulentas, em processos de cicatriza??o, queimaduras e como agente anti-trombol?tico. Realizou-se este estudo com o objetivo de selecionar leveduras produtoras de proteases, avaliar as melhores condi??es de crescimento da esp?cie produtora de protease, caracterizar parcialmente a enzima quanto o pH e temperatura na estabilidade e verificar o efeito desta enzima na degrada??o do col?geno. Foram analisadas 50 amostras de leveduras isoladas de diferentes substratos, provenientes da cole??o de cultura DPUA. As amostras foram cultivadas em extrato de Malte suplementado com gelatina 1,0 % a 30 ?C, sob agita??o (140 rpm) por 72 horas. A atividade proteol?tica qualitativa foi determinada em meio s?lido ?gar gelatina-leite e a quantitativa utilizando como substrato azocase?na 1 % p/v. Foram estabelecidas, para a esp?cie selecionada, as melhores condi??es de cultivo para produ??o da protease, foram estudados: caracter?sticas de patogenicidade, tamanho e idade do in?culo, temperatura ?tima de crescimento, fontes de carbono e nitrog?nio. Foram avaliadas as melhores condi??es de estabilidade da protease pH (6-12) e temperatura (25 ?, 37 ?, 40 ?, 50 ?, 60 ?, 70 ? e 80 ?C) e tamb?m, o efeito da enzima na degrada??o do col?geno. A determina??o da atividade colagenol?tica foi realizada em meio s?lido utilizando col?geno sol?vel como ?nica fonte de carbono. Selecionou-se, entre as esp?cies identificadas, Trichosporon pullulans (DPUA), por apresentar o maior valor de atividade proteol?tica em ensaio qualitativo (halo = 27 mm) e em ensaio quantitativo (420 U/mL). Os experimentos realizados para detectar as caracter?sticas de patogenicidade desta esp?cie demonstraram crescimento positivo a 37 ?C, atividade ure?sica positiva e n?o foi detectada atividade fosfolip?sica; a maior atividade proteol?tica (246,66 U/mL) foi detectada com in?culo que correspondeu a 10 % do volume de meio e cultura estoque de 24 horas de crescimento. Os ensaios realizados para verificar o efeito da temperatura no crescimento e na produ??o da protease demonstraram que a maior biomassa (3,46 mg/mL) e atividade proteol?tica (513,33 U/mL) foram obtidas a 30 ?C. A melhor fonte de carbono foi sacarose 1,0 % produzindo maior crescimento (6,18 mg/mL) e maior atividade prote?sica (580 U/mL) e como fonte de nitrog?nio destacou-se a peptona 0,5 % expressando os maiores valores de atividade proteol?tica (755,55 U/mL) e biomassa de 7,55 mg/mL. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que a protease produzida por T. pullulans classifica-se como protease alcalina (pH ?timo 8,0). E maior estabilidade t?rmica da protease foi observada a 37 ?C onde a enzima manteve 100 % de sua atividade durante 40 minutos de incuba??o. T. pullulans degradou o col?geno produzindo halo de 28 mm. Esse estudo demonstrou que a protease apresenta atividade colagenol?tica e poder? ser utilizada como agente terap?utico",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias da Sa?de},
 	note = {Faculdade de Medicina}
}