@PHDTHESIS{ 2013:225028947, title = {Constru??o de um sistema de veicula??o e express?o de DNAzimas para Escherichia coli: um prot?tipo para a fagoterapia}, year = {2013}, url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/4921", abstract = "Os oligonucleot?deos antissenso apresentam grande potencial para serem utilizados como agentes terap?uticos. As DNAzimas 10-23 s?o as mol?culas antissenso com maior estabilidade qu?mica e efici?ncia catal?tica. Neste trabalho foi desenvolvido um sistema para a express?o de DNAzimas regulado por dois promotores, constru?do dentro de um fagom?deo que foi denominado pDESCP. A express?o da enzima MoMuLV-RT ocorre de forma constitutiva, por meio do promotor pA1. O segundo cassete, regulado pelo promotor lac, expressa um transcrito de RNA que originar? a DNAzima. MoMuLV-RT atuar? sobre o substrato de RNA, produzindo DNAzimas por meio da transcri??o reversa. A DNAzima ftsZ, utilizada para validar esse sistema, foi eficientemente expressa e capaz de alterar a morfologia de Escherichia coli, que passou da forma bacilar para a filamentosa. Quando devidamente encapsidado pelo fago M13, pDESCP foi utilizado para transfectar diferentes linhagens E. coli F+. Ensaios cin?ticos in vitro envolvendo DNAzimas com alvo sobre os transcritos dos genes de alanina racemase de E. coli, alr e dadX, n?o demonstraram resultados conclusivos. Isto impossibilitou que estas fossem testadas no fagom?deo. A veicula??o de pDESCP para E. coli F+ e a possibilidade de inser??o de novas DNAzimas em sua estrutura transformam este fagom?deo em um importante prot?tipo para a fagotarapia. Na condi??o de que DNAzimas letais sejam desenvolvidas contra E. coli, estas podem ser inseridas em pDESCP e transform?-lo em uma poderosa ferramenta capaz de impedir a transmiss?o de genes de patogenicidade, a partir de bact?rias conjugativas.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }