@MASTERSTHESIS{ 2013:765104249, title = {An?lise investigativa dos fatores de virul?ncia de cepas selvagens de shigella SPP. in vivo e seu potencial inflamat?rio}, year = {2013}, url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5194", abstract = "Shigelose ? uma disenteria bacilar causada pela Shigella, um pat?geno Gram negativo e intracelular. Um dos modelos animais mais comuns para avaliar a resposta imune da Shigella ? a infec??o pulmonar em camundongos devido a f?cil manipula??o e similaridade com as respostas intestinais. Neste estudo, n?s levantamos a hip?tese de como cepas cl?nicas isoladas de pacientes com shigelose possuem express?o de resposta imune diferencial quando comparados com cepas padr?es (M90T). Nossa principal proposta foi analisar quatro cepas de Shigella cl?nicas com diferentes genes de virul?ncia e a cepa padr?o M90T quanto as respostas imunes ap?s invas?o murina em 24 e 48h. M?todos: Cepas cl?nicas de Shigella foram selecionadas pela presen?a de genes de virul?ncia espec?ficos por PCR. Primers relacionados ao sistema imune foram desenvolvidos. As cepas cl?nicas e a padr?o foram submetidas ? an?lise de express?o g?nica pelo Fluidigm (Bioamark Platform). Os resultados foram analisados em programa estat?stico R. Resultados: N?s agrupamos os mRNA em cinco grupos: Pr? Inflamat?rios (CXCL15, IL-1?, IL-6, IFN-?, TNF-?), Anti Inflamat?rios (TGF-?1, TGF-?2 e TGF-?3), Resposta Inata (NOD 1, NOD 2, TLR4 e TLR9), Resposta adaptativa (Th1-like, IFN- ?, IL-17A e IL-17B) e Macr?fago (NOS, H2 -A?1, H2-E?, H2-K1, MHC-like 2). Como principais resultados, todas as amostras cl?nicas demonstraram uma express?o mRNA em 24h de infec??o que foi gradativamente aumentado ap?s 48h, enquanto a cepa padr?o M90T teve a regula??o oposta com taxas de mRNA em 48h, sugerindo grandes diferen?as entre as respostas a cepas cl?nicas e a padr?es bem caracterizados. A cepa cl?nica #5 n?o alterou a express?o de mRNA em 24 e 48h nos genes da resposta adaptativa, sugerindo baixas taxas de invas?o e controle do hospedeiro nas etapas iniciais da infec??o. A cepa cl?nica #11 demonstrou alta atividade macrof?gica devido a maior express?o de IFN-? e NOS. A cepa #14 e #27 demonstraram um poss?vel potencial de prote??o Th1 devido a alta express?o mRNA para MHC-like II e Th1 quando comparado a outras cepas e o controle positivo. A presen?a de alta express?o de IL-17 na cepa #27 rela??o com c?lulas Th17. O potencial imunol?gico da cepa #27 pode ter rela??o com as enterotoxinas (shET1A, shET1B e shET2). A presen?a do conjunto completos destas enterotoxinas foi confirmado na cepa #27 por PCR. Conclus?o: As diferen?as entre cepas cl?nicas e padr?es foram evidentes neste estudo. Cepa cl?nica 27 parece ser uma ?tima candidata para estudos futuros e pode prover novas perspectivas para as diferen?as de invas?o e resposta imune vista nos hospitais.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Imunologia B?sica e Aplicada}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }