@MASTERSTHESIS{ 2011:447398330, title = {Ontog?nese, diversidade genot?pica de respostas e an?lise prote?mica de etapas envolvidas na embriog?nese som?tica de dendezeiro (Elaeis guineensis JACQ.)}, year = {2011}, url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5210", abstract = "Este trabalho tem como objetivo avaliar respostas genot?picas durante a embriog?nese som?tica a partir de embri?es zig?ticos de dendezeiros (Elaeis guineensis Jacq.), bem como avaliar a ontog?nese e identificar prote?nas diferencialmente expressas durante as diferentes etapas do processo embriog?nico. Foram utilizados embri?es zig?ticos de nove gen?tipos: C2001, C2328, C2301, C3701, CM1115, C7201, C2528, C2501 e CN1637. Inicialmente, os embri?es zig?ticos foram inoculados em meio de cultura para a indu??o de calos (450 ?M de Picloram), com subcultivos a cada 30 dias. Ap?s 150 dias, os calos foram transferidos para dois meios de cultura visando ? diferencia??o e matura??o de embri?es som?ticos: MTD -1 (0,6?M de ANA e 12,3 ?M de 2-iP) e MTD-2 (40 ?M de Picloram). Ap?s 90 dias, os calos com embri?es som?ticos foram transferidos para o meio de regenera??o, desprovido de reguladores de crescimento. Em todas as etapas os explantes foram mantidos em sala de crescimento com temperatura de 25?2?C e sob condi??es de escuro. A an?lise mofo-anat?mica foi realizada durante todo o processo embriog?nico. J? a an?lise prote?mica foi coletada amostras dos embri?es zig?ticos (E1), explantes intumescidos com 14 dias (E2) em meio de indu??o, calo prim?rio (E3) e calo pr?-embriog?nico (E4). Verificou-se que os gen?tipos testados apresentam diferentes respostas morfog?nicas in vitro. Na fase de indu??o, os gen?tipos C2501, C2001, C7201, C2528, C2328 e C3701 apresentaram os melhores resultados na forma??o de calos embriog?nicos, com valores entre 90 e 100%. Ap?s 90 dias de regenera??o, os gen?tipos que apresentaram os melhores resultados para forma??o e regenera??o de embri?es som?ticos foram o C2328 e CM1115. As analises anat?micas permitiram observar aos 14 dias em meio de indu??o a forma??o das primeiras divis?es nas c?lulas proc?mbiais e perivasculares. Essa regi?o progrediu para a forma??o de massas meristem?ticas, ap?s 21 dias, indicando sua origem procambial e perivascular. Calos prim?rios surgiram ap?s 45 dias de cultura, seguido da progress?o para calos embriog?nicos aos 90 dias. A forma??o de proembri?es, a partir das c?lulas meristem?ticas, ocorreu ap?s 135 de cultivo. Os proembri?es apresentavam-se isolados do tecido de origem, pelo leve espessamento da parede celular, indicando sua origem unicelular. Quando transferidos para fase de matura??o, nos meios de cultura MTD -1 (0,6?M de ANA e 12,3 ?M 2-iP) e MTD-2 (40 ?M picloran), observou-se a regenera??o de embri?es som?ticos em diferentes est?gios de desenvolvimento (globular-torpedo). Os embri?es diferenciados apresentaram protoderme, cord?es de proc?mbio e pl?mula. Em seguida foram transferidos para o meio de cultura isento de reguladores de crescimento (fase de regenera??o de plantas), no qual foi observada a convers?o dos embri?es som?ticos em plantas. O ac?mulo de amido durante o processo de embriog?nese som?tica concentrou-se pr?ximos aos centros de intensa divis?o celular, e no c?rtex dos calos prim?rios e embriog?nicos. No entanto, nos diferentes est?gios de embri?es som?ticos n?o foi observado o ac?mulo de amido. J? a an?lise prote?mica identificou prote?nas envolvidas no processo de aquisi??o da compet?ncia embriog?nica. As prote?nas foram categorizadas em sete grupos de acordo com sua fun??o biol?gica, bem como pela participa??o em vias metab?licas distintas: 1) prote?nas expressas em condi??es de estresse; 2) prote?nas envolvidas no ciclo celular; 3) prote?nas envolvidas no ac?mulo de amido; 4) prote?nas do metabolismo energ?tico; 5) prote?na do metabolismo do nitrog?nio; 6) processamento das prote?nas; e 7) prote?nas do embri?o zig?tico. O conhecimento da reconstitui??o in vitro dos eventos, fisiol?gicos, genot?picos, ontog?nicos e bioqu?micos, que envolvem o processo de embriog?nese som?tica em E. guineenses, permiti um maior entendimento da clonagem da esp?cie, seja para a produ??o de mudas em escala, seja para acelerar programas de melhoramento gen?tico da cultura.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }