@MASTERSTHESIS{ 2014:1172785210,
 	title = {Express?o de fosfatase alcalina em Escherichia coli sob o controle do sistema de regula??o do operon lac},
 	year = {2014},
 	url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5332",
 	abstract = "A fosfatase alcalina tem como fun??o catalisar a hidr?lise de um fosfomono?ster, e
 assim, possui a propriedade de remover grupos de fosfatos 5? de DNA e RNA, o que
 faz dela uma importante ferramenta para engenharia gen?tica. A express?o do gene da
 fosfatase alcalina de E. coli foi obtida clonando-se o gene no plasm?deo pBR322.
 Posteriormente o gene estrutural phoA foi transferido para o vetor pAC92, derivado do
 pUC18, onde sua express?o ficou parcialmente regulada, originando o plasm?deo
 recombinante capaz de programar em E. coli maior n?vel de express?o. Por?m este
 vetor possui a necessidade do controle da express?o com glicose no meio, do
 contr?rio, o excesso da enzima no periplasma causa a morte celular das hospedeiras.
 Em trabalhos desenvolvidos no Laborat?rio de Tecnologias de DNA da UFAM um vetor
 denominado pULA foi constru?do a partir da obten??o da regi?o promotora do pAC92,
 com operador restaurado, clonado em um vetor denominado de pUN, este sendo o
 pUC18 modificado sem o gene de ??galactosidase e sem sua regi?o
 promotora/operadora de origem. O presente trabalho descreve a express?o da
 fosfatase alcalina de E. coli por meio do sistema de express?o regul?vel do pULA,
 assim como a purifica??o desta enzima. Dessa forma, o gene phoA foi subclonado no
 vetor pULA com sucesso, dando origem ao vetor pUNF, que se apresentou est?vel e
 funcional, regulado pela indu??o do IPTG. A melhor express?o da enzima no sistema
 em quest?o, ocorreu em meio com concentra??o de 0,05% de glicose, com um 1mM
 de IPTG e ap?s 18 horas de indu??o.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}