@MASTERSTHESIS{ 2014:246722730,
 	title = {Expressão de fosfatase alcalina em Escherichia coli sob o controle do sistema de regulação do operon lac},
 	year = {2014},
 	url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5332",
 	abstract = "A fosfatase alcalina tem como função catalisar a hidrólise de um fosfomonoéster, e
 assim, possui a propriedade de remover grupos de fosfatos 5’ de DNA e RNA, o que
 faz dela uma importante ferramenta para engenharia genética. A expressão do gene da
 fosfatase alcalina de E. coli foi obtida clonando-se o gene no plasmídeo pBR322.
 Posteriormente o gene estrutural phoA foi transferido para o vetor pAC92, derivado do
 pUC18, onde sua expressão ficou parcialmente regulada, originando o plasmídeo
 recombinante capaz de programar em E. coli maior nível de expressão. Porém este
 vetor possui a necessidade do controle da expressão com glicose no meio, do
 contrário, o excesso da enzima no periplasma causa a morte celular das hospedeiras.
 Em trabalhos desenvolvidos no Laboratório de Tecnologias de DNA da UFAM um vetor
 denominado pULA foi construído a partir da obtenção da região promotora do pAC92,
 com operador restaurado, clonado em um vetor denominado de pUN, este sendo o
 pUC18 modificado sem o gene de β–galactosidase e sem sua região
 promotora/operadora de origem. O presente trabalho descreve a expressão da
 fosfatase alcalina de E. coli por meio do sistema de expressão regulável do pULA,
 assim como a purificação desta enzima. Dessa forma, o gene phoA foi subclonado no
 vetor pULA com sucesso, dando origem ao vetor pUNF, que se apresentou estável e
 funcional, regulado pela indução do IPTG. A melhor expressão da enzima no sistema
 em questão, ocorreu em meio com concentração de 0,05% de glicose, com um 1mM
 de IPTG e após 18 horas de indução.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ciências Biológicas}
}