@PHDTHESIS{ 2012:1837395839, title = {Investiga??o de tuberculose pulmonar por infec??o policlonal de Mycobacterium tuberculosis e poss?vel associa??o com a resist?ncia aos f?rmacos antimicobacterianos}, year = {2012}, url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5369", abstract = "Na pr?tica cl?nica ? amplamente admitido que um epis?dio de tuberculose (TB) ativa seja causado por um ?nico clone de Mycobacterium tuberculosis. Contudo, v?rios estudos t?m revelado que h? uma heterogeneidade de clones e isso pode ser bem maior que o esperado. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi investigar a TB pulmonar por infec??o policlonal de M. tuberculosis em pacientes rec?m-diagnosticados, a partir de uma amostra de escarro e antes do in?cio do tratamento. Foram selecionadas 62 amostras de escarros, sendo 31 paucibacilares e 31 multibacilares. A triagem de clones em meio de 7H10 proporcionou o isolamento de clones sens?veis e resistentes ? Isoniazida (INH) e/ou Rifampicina (RIF) coexistentes em 19 (30,6%) isolados de M. tuberculosis. A genotipagem por DRE-PCR e o sequenciamento parcial de DNA para os genes katG, inhA e rpoB foram realizados em 74 clones sens?veis ? INH e RIF, 65 clones resistentes ? INH, 1 clone resistente ? RIF e 3 clones resistentes ? INH e RIF. A presen?a de clones sens?veis e resistentes a INH e/ou RIF, assim como a ocorr?ncia de diferentes gen?tipos indicam a heterogeneidade de clones em um mesmo isolado de M. tuberculosis. A frequ?ncia de infec??o policlonal observada foi superior aos estudos descritos na literatura, visto que os mesmos apresentaram percentuais de 0,4% a 19,0%. Estes resultados permitem afirmar que a presen?a de infec??o policlonal n?o ? um fen?meno raro em pacientes com TB pulmonar na popula??o estudada. O sequenciamento parcial dos genes katG revelou que apenas 4,4% dos clones resistentes ? INH apresentaram as muta??es comumente descritas neste gene. Para o gene inhA n?o foram detectadas muta??es para os clones resistentes ? INH. Os clones resistentes para RIF apresentaram muta??es no gene rpoB. Dos clones resistentes ? INH, 83,8% n?o apresentaram muta??es nos genes katG e inhA, enquanto 11,7% apresentaram muta??es ainda n?o descritas no gene katG. A aus?ncia das muta??es comumente associadas ? resist?ncia medicamentosa nos genes katG e inhA e a detec??o de novas muta??es em clones de M. tuberculosis resistentes ? INH, explicitam a necessidade de sequenciar fragmentos maiores desses genes ou ampliar a busca de muta??es em outros genes, a fim de que sejam propostas estrat?gias mais r?pidas para a detec??o de resist?ncia em M. tuberculosis. Os resultados da presente pesquisa evidenciam que a infec??o policlonal est? presente em aproximadamente 1/3 dos pacientes de TB rec?m-diagnosticados, seja pelas caracter?sticas fenot?pica ou genot?pica dos clones de M. tuberculosis, embora estas n?o estejam estritamente relacionadas.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas - Instituto Nacional de Pesquisas da Amaz?nia}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }