@PHDTHESIS{ 2016:1084561321,
 	title = {Isolamento, caracteriza??o estrutural e funcional de uma nova fosfolipase A2 Lys49 (BnuTX-I) do veneno de Bothrops neuwiedi urutu (Amaral, 1937)},
 	year = {2016},
 	url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5976",
 	abstract = "Os componentes do veneno de serpentes do g?nero Bothrops apresentam uma variada gama de a??es biol?gicas ainda n?o completamente identificadas ou esclarecidas. Dos compostos, as fosfolipases A2 v?m demonstrando diferentes potenciais para aplica??es biotecnol?gicas. Os objetivos deste estudo foram isolar e caracterizar bioqu?mica e biologicamente uma fosfolipase A2 Lys49 do veneno da serpente Bothrops neuwiedi urutu. A prote?na foi obtida com elevado grau de pureza ap?s duas etapas cromatogr?ficas, sendo a primeira de troca ani?nica (coluna DEAE) e a segunda de fase reversa em coluna C18. O grau de pureza e a massa molecular relativa foram avaliados por SDS-PAGE, obtendo-se uma massa molecular t?pica de svPLA2 de aproximadamente 14 kDa, que foi posteriormente confirmada por Espectrometria de Massa obtendo-se o valor de massa (m/z) de 13.733 Da. A an?lise da atividade fosfolip?sica, realizada sob o substrato 4N3OBA, mostrou que a PLA2 isolada ? enzimaticamente inativa. As an?lises pelo m?todo de degrada??o de Edman e dos fragmentos pept?dicos permitiram a identifica??o de 108 res?duos de amino?cidos da toxina, sendo observada elevada identidade com outras fosfolipases presentes no veneno de outras esp?cies de serpentes do g?nero Bothrops. Os dados confirmaram tratar-se de uma isoforma in?dita de PLA2-Lys49 do veneno de B. n. urutu, denominada BnuTX-I. O modelamento, na forma dim?rica, da estrutura molecular da toxina mostrou homologia com cerca de 99,15% com a PLA2-hom?loga 1 de Bothrops jararacussu (c?digo PDB: 3I03), bem como a identifica??o das estruturas terci?ria e do s?tio ativo. Os ensaios biol?gicos mostraram, em modelos murinos, que tanto a BnuTX-I quanto o veneno foram capazes de induzir respostas edematog?nica e miot?xica. A atividade hemorr?gica foi observada somente para o veneno. Os ensaios antimicrobianos e parasit?rios realizados com veneno e BnuTX-I mostraram majoritariamente a inibi??o do crescimento das cepas de P. aeruginosa e de formas promastigota de L. amazonensis com CC50 de 22,91 ?g/mL e com ?ndice de seletividade (IS) de 0,44. Quanto aos efeitos citot?xicos, da BnuTX-I sobre macr?fagos murinos, observou-se que a toxina apresentou citotoxidade em diferentes concentra??es (?g/mL) e produ??o de citocinas IL 1?. Os resultados possibilitaram a identifica??o e caracteriza??o de uma nova isoforma de miotoxina com pontecial para futuras aplica??es biotecnol?gicas.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Biodiversidade e Biotecnologia da Amaz?nia Legal - BIONORTE},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}