@PHDTHESIS{ 2017:1140123832, title = {Aperfei?oamento da embriog?nese som?tica, reprodu??o e an?lise molecular de retrocruzamentos interespec?ficos em palma de ?leo (Elaeis spp.)}, year = {2017}, url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6463", abstract = "Neste trabalho, tr?s cap?tulos s?o propostos: 1) Otimiza??o da embriog?nese som?tica em palma de ?leo (Elaeis spp.) a partir de embri?es zig?ticos maturos; 2) Influ?ncia da espessura inicial de corte sobre a diferencia??o de embri?es som?ticos em palma de ?leo utilizando a t?cnica Thin Cell Layer (TCL) e; 3) Reprodu??o vegetativa de retrocruzamentos interespec?ficos de palma de ?leo por embriog?nese som?tica. No primeiro cap?tulo foi desenvolvido um sistema para a indu??o de embriog?nese som?tica e regenera??o de plantas a partir de embri?es zig?ticos maturos de palma de ?leo. Calos embriog?nicos (CE) foram induzidos por embri?es zig?ticos (EZ) maturos em meio de Murashige e Skoog (MS) modificado, com o ?cido 2,4-diclorofenoxiac?tico (2,4-D) ou picloram e em combina??o ou n?o com carv?o ativado. A maior percentagem de indu??o de CE (97,5%) foi obtida atrav?s da cultura de embri?es zig?ticos maturos no meio de MS modificado com 450 ?M de picloram e 2,5 g.L-1 de carv?o ativado. Os CE proliferaram facilmente em meios com concentra??es reduzidas de picloram. Esses CE foram repicados em meio de MS suplementado com 12,3 ?M de 2-isopenteniladenina (2iP) e 0,54 ?M de ?cido naftalenoac?tico (ANA), com subcultivos em intervalos de 4 semanas. Os embri?es som?ticos foram convertidos em plantas em meio de MS modificado com macro e micronutrientes, suplementado com 20 g.L-1 de sacarose, 2,5 g.L-1 de carv?o ativado e 2,5 g.L-1 de Phytagel?. A an?lise revelou que morfohistologicamente a embriog?nese som?tica seguiu uma via indireta. Calos prim?rios foram observados ap?s 4-6 semanas de cultura que progrediram para CE em 12 semanas. C?lulas embriog?nicas exibiram um protoplasma denso, uma rela??o nucleopl?smica alta, e pequenos gr?os de amido. Proembri?es formados ap?s 16-20 semanas de cultura e com sucessivas divis?es celulares, t?m origem multicelular. Embri?es som?ticos diferenciados apresentaram haust?rio, pl?mula, e a primeira e segunda bainhas foliares. Nesta fase, a protrus?o radicular n?o foi aparente, pois isso ocorre geralmente ap?s emers?o das primeiras folhas verdadeiras. No segundo cap?tulo, explantes obtidos por cortes de plantas de 1 mm, 2 mm e 3 mm de espessura foram estabelecidos em meio de cultura de MS, com Picloram (450 ?M). Utilizando TCL foi poss?vel induzir eficientemente a embriog?nese som?tica em palma de ?leo. Os gen?tipos e a espessura dos explantes exerceram influ?ncia na indu??o da embriog?nese som?tica, mas explantes de menor espessura (at? 2 mm de espessura) se mostram os mais responsivos. Os gen?tipos tamb?m exercem uma forte influ?ncia na indu??o da embriog?nese som?tica, pois mostraram importantes diferen?as quanto ? percentagem de calos embriog?nicos e n?mero de embri?es som?ticos por calo. Por fim, o terceiro cap?tulo prop?s um m?todo para a reprodu??o vegetativa de EZ de retrocruzamentos interespec?ficos de palma de ?leo por embriog?nese som?tica, bem como, analisar a fidelidade gen?tica e epigen?tica por meio da utiliza??o de marcadores ISSR e AFLP das plantas regeneradas. Para tanto, 195, 281 e 198 embri?es zig?ticos de sementes maduras dos respectivos retrocruzamentos interespec?ficos SQ150, SR78 e SR84 foram cultivados sob as condi??es do experimento desenvolvido no Cap?tulo 1, com pequenas modifica??es. Dos regenerantes, 36 plantas de 3 diferentes embri?es zig?ticos foram aleatoriamente avaliadas por marcadores ISSR e AFLP (MSAP) quanto a poss?veis varia??es gen?ticas e epigen?ticas. Ap?s 36 meses do in?cio do cultivo, as taxas de regenera??o de plantas alcan?aram entre 6,2% e 34,2% dos EZ inoculados inicialmente. Quando se avaliou os regenerantes por ISSR foi poss?vel inferir que indiv?duos regenerados de EZ podem apresentar entre 97,5% e 100% de similaridade quando avaliadas dentro da mesma matriz que lhe deu origem (intrapopula??es). No entanto, quando os indiv?duos s?o comparados com plantas regeneradas de outros EZ utilizados como matrizes, eles podem apresentar variabilidade gen?tica superior a 20%, ou seja, similaridade gen?tica de apenas 80% (interpopula??es). Na an?lise por AFLP (MSAP) verificou-se a amplifica??o de 357 locos nas 36 plantas avaliadas. Nessas amplifica??es, constatou-se que 69% destas regi?es revelaram-se sens?veis ? metila??o e, destas, 58% foram ocasionadas pelo ganho de fragmentos, ou seja, pela hipometila??o do DNA gen?mico.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Biodiversidade e Biotecnologia da Amaz?nia Legal - BIONORTE}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }