@MASTERSTHESIS{ 2018:1001641096,
 	title = {Desenvolvimento e aplica??o de modelo de pele humana reconstru?da in vitro para estudos de citotoxicidade e genotoxicidade},
 	year = {2018},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6599",
 	abstract = "O desenvolvimento de m?todos alternativos in vitro baseia-se no refinamento, redu??o e
 substitui??o ao uso de animais em experimenta??o e t?m sido desenvolvidos para testar a
 seguran?a de cosm?ticos e medicamentos. ? importante considerar as dificuldades que o Brasil
 enfrenta com quest?es alfandeg?rias e de perecibilidade que dificultam e at? mesmo impedem
 a utiliza??o de modelos de pele humana reconstru?da dispon?veis comercialmente. Este trabalho
 teve como objetivo desenvolver um modelo de pele humana reconstru?da (PHR-UFAM) in vitro
 utilizando c?lulas de cultura permanente e testar suas aplicabilidades para ensaios de
 citotoxicidade e genotoxicidade. Para isso, as peles foram geradas utilizando queratin?citos e
 fibroblastos (embebidos em col?geno) humanos permanentes. O controle de qualidade das peles
 foi feito por an?lise morfol?gica e imunohistoqu?mica, a viabilidade pelo teste do MTT com o
 controle negativo e teste de fun??o barreira. A aplicabilidade para ensaios de genotocixidade
 foi avaliada pelo teste do micron?cleo, cometa em pH alcalino e neutro e cometa modificado
 para detec??o de s?tios de metila??o no DNA com os controles positivos de cada teste definidos
 pela OECD e pela literatura. A melhor condi??o testada permitiu o desenvolvimento de uma
 pele humana reconstru?da (PHR-UFAM) com uma camada epid?rmica apresentando express?o
 de marcadores imunohistoqu?micos epiteliais (citoqueratinas) e d?rmico (vimentina). O modelo
 atendeu aos par?metros de qualidade (histologia, viabilidade e fun??o barreira) e apresentou
 semelhan?a morfol?gica com os modelos reconhecidos e validados pela OECD. A
 aplicabilidade para ensaios de genotoxicidade evidenciou efetividade dos controles positivos:
 Mitomicina C, que foi capaz de aumentar significativamente a frequ?ncia de micron?cleos em
 3,03% e 3,51% nas concentra??es de 1,5 e 3 ?g/mL; Etilmetanossulfonato, que causou dano ao
 DNA no modelo de pele quando testado nas concentra??es de 5 e 10 ?M, avaliado pelo ensaio
 do cometa tanto na vers?o alcalina (?ndices de dano iguais a 59,3 e 103,7, respectivamente)
 quanto na neutra (?ndices de dano iguais a 40,7 e 125, respectivamente); e 5-azacitidina no
 ensaio do cometa modificado para detec??o de metila??o no DNA testada nas concentra??es
 0,5, 1 e 1,5 ?M, que apresentou ?ndices de dano reduzidos iguais a 107,5, 83,1 e 89,3,
 respectivamente, no modelo de pele PHR-UFAM. Os resultados foram comparados com o
 controle n?o tratado. Diante do exposto, com este trabalho foi poss?vel desenvolver um modelo
 de pele humana reconstru?da composta totalmente de c?lulas permanentes semelhante aos
 modelos validados e reconhecidos na literatura. Contudo, ? necess?ria a realiza??o de estudos
 de valida??o complementares que comprovem sua efetividade para ensaios de citotoxicidade e
 genotoxicidade de subst?ncias com potencial terap?utico ou cosm?tico.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas},
 	note = {Faculdade de Ci?ncias Farmac?uticas}
}