@MASTERSTHESIS{ 2019:1423370674,
 	title = {Clonagem e express?o do gene da quitinase de Anopheles gambiae em Pichia pastoris},
 	year = {2019},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7286",
 	abstract = "Sendo integrante da classe das glicos?deo-hidrolases, as quitinases (EC 3.2.1.14) atuam na clivagem de s?tios rand?micos da mol?cula de quitina atrav?s de hidr?lise, formando cadeias de quitooligossacar?deos. Estruturalmente possuem subdom?nios catal?ticos que a auxiliam na liga??o ao seu substrato insol?vel e ruptura da conforma??o cristalina. O potencial enzim?tico dessas enzimas compreende principalmente o controle biol?gico de fito-pat?genos f?ngicos e insetos vetores, organismos onde a quitina ? um componente estrutural da parede celular ou exoesqueletos. Entretanto, sua aplicabilidade se estende ? s?ntese de polissacar?deos artificiais, isolamento de protoplastos f?ngicos e estimativa de biomassa em processos industriais. A partir do sequenciamento do genoma de Anopheles gambiae foi obtido o gene atribu?do a express?o de quitinase, de maneira que atrav?s de s?ntese qu?mica esse gene foi clonado em Escherichia coli (linhagem DH5?), e integrado ao genoma de Pichia pastoris nos vetores de express?o pPIC9 e pPICPGK. A atividade enzim?tica de 19 clones foi confirmada por an?lise do halo de degrada??o de quitina coloidal, e ap?s a sele??o foi realizada produ??o submersa em frascos agitados e caracteriza??o bioqu?mica da enzima por delineamento central composto rotacional (DCCR). A clonagem e obten??o de vetores de express?o recombinantes foi consolidada de maneira que a integra??o ao genoma da levedura apresenta n?vel significante de express?o, na atividade enzim?tica fatores como tempo de incuba??o e temperatura n?o revelaram signific?ncia, e o fator pH se demonstrou com reposta positiva em faixas mais ac?dicas.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}