@MASTERSTHESIS{ 2019:1744681439,
 	title = {Influ?ncia de modifica??es na t?cnica de microdilui??o em caldo (CLSI, protocolo M27-A3) na determina??o de sensibilidade de leveduras ao fluconazol},
 	year = {2019},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7639",
 	abstract = "Uma das principais cr?ticas ? metodologia de estudo da atividade antif?ngica padronizada pela Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) ? protocolo M27-A3 ? o custo do meio de crescimento RPMI-1640 e do tamp?o MOPS (?cido 3-(N-morfolino) propanosulf?nico). Devido ? essas limita??es, o presente trabalho teve como objetivo investigar a influ?ncia de modifica??es na t?cnica de microdilui??o em caldo (CLSI, protocolo M27-A3) na determina??o de sensibilidade de leveduras ao fluconazol. Para avaliar esse objetivo foram realizados ensaios univariados modificando o ensaio preconizado pela CLSI protocolo M27-A3. Leveduras utilizadas nos ensaios pertenceram aos g?neros Candida e Cryptococcus. As modifica??es feitas no protocolo M27-A3 foram: a) mudan?a de meio de cultura (cinco meios foram avaliados: o meio YNB e quatro diferentes varia??es da composi??o de Sabouraud); b) tipo de tamp?o (bicarbonato de s?dio, tris-HCL e fosfato), concentra??o do in?culo (102, 104, 105 c?lulas/mL), tempo de incuba??o (24 e 48 h) e forma de leitura (visual, corante e espectrofot?metro) na concentra??o inibit?ria m?nima das leveduras frente ao fluconazol. Os diferentes meios de cultivo avaliados (exceto o meio dextrose 2% e peptona de case?na 1%) resultaram em resultados similares de CIM aos ensaios realizados com o meio padr?o RPMI. Os ensaios com tamp?o Tris-HCl resultaram em resultados similares de CIM aos ensaios realizados com o tamp?o padr?o MOPS. A concentra??o de 1x103 c?lulas/mL foi a ?nica concentra??o testada que resultou em resultados similares ao protocolo padr?o. Somente o tempo incuba??o do ensaio 24hs demonstrou ser adequado para o g?nero Candida. A leitura visual direta, visual com uso de corante biol?gico (resazurina) e por espectrofotometria apresentaram resultados semelhantes. A partir do conhecimento obtido nos experimentos univariados um novo protocolo foi proposto: a) meio de cultivo: dextrose 5 g/L e peptona de soja 10 g/L; b) tamp?o: Tris-HCL; c) in?culum de 0,5-2,5 x103, d) ensaio de 24 h para Candida spp e 48hs para Cryptococcus neoformans e e) leitura visual direta. A an?lise de vari?ncia demonstrou 95% de regress?o comparando-se os resultados da CIM de 19 leveduras submetidas ao antifungigrama pelo protocolo da CLSI e o proposto no presente estudo. Esses resultados s?o importantes e robustos e apresentam uma op??o mais acess?vel para a realiza??o dos ensaios de antifungigrama. No entanto, se faz necess?rio um estudo multic?ntrico, com um n?mero maior de micro-organismos, para avaliar o efeito do meio nas varia??es intra e interlaboratoriais nas CIM de fluconazol para as leveduras.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas},
 	note = {Faculdade de Ci?ncias Farmac?uticas}
}