@MASTERSTHESIS{ 2015:50120779, title = {Avalia??o da rea??o em cadeia da polimerase quantitativa na detec??o de Mycobacterium leprae em casos de hansen?ase de dif?cil diagn?stico}, year = {2015}, url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7951", abstract = "A hansen?ase ? doen?a infecto-contagiosa causada pelo Mycobacterium leprae (M. leprae) que afeta principalmente a pele e nervos perif?ricos e pode causar incapacidades f?sicas as quais evoluem, potencialmente, para deformidades f?sicas permanentes. O paciente hanseniano pode ser classificado como paucibacilar e multibacilar, sendo as formas paucibacilares de dif?cil diagn?stico. Novos m?todos moleculares de alta sensibilidade e especificidade como PCR em Tempo Real qPCR, tem contribu?do para diagn?stico da hansen?ase, principalmente nos casos de dif?cil diagn?stico. Este estudo foi desenvolvido na Funda??o de Dermatologia Tropical e Venereologia Alfredo da Matta, Manaus ? Amazonas, no per?odo de mar?o de 2014 a agosto de 2015, e teve o intuito de validar a t?cnica de qPCR na detec??o de M. leprae em bi?psias cut?neas de pacientes com suspeita cl?nica de hansen?ase e submetidos a exame histopatol?gico. As amplifica??es por qPCR a partir de uma sequ?ncia espec?fica do gene 16S de M. leprae foram realizadas em 180 amostras, das quais, 82 eram bi?psias frescas e 98 bi?psias parafinadas. Das bi?psias frescas, foram analisadas 65 amostras, entre as quais est?o 9 amostras de pacientes com outras dermatoses, 12 amostras clinicamente inconclusivas e 38 amostras de pacientes com hansen?ase. Destes, 68,5% (26/38) foram positivos no teste molecular para a hansen?ase e 33,3% (3/9) foram positivas para outras dermatoses. A sensibilidade foi de 68,5%, especificidade de 66,70%, com valor preditivo positivo de 89,7% e valor preditivo negativo de 33,3%. Entre as bi?psias parafinadas, foram analisadas somente 61 amostras dos pacientes com hansen?ase, as quais 73,8% foram positivas. Nestas amostras, o teste molecular apresentou sensibilidade de 73,8%. Al?m disso, o n?mero de genomas foi estimado nos dois grupos de bi?psias e variou de 8,53 (em uma bi?psia parafinada) a 2.060.230 (em uma bi?psia fresca). Os dados sugerem claramente que o qPCR confirmam a diferen?a entre pacientes MB e PB tanto em bi?psias frescas quanto em bi?psias parafinadas sendo que as quantidades de genomas percentualmente e quantitativamente foi maior em pacientes MB no grupo de amostras frescas quando comparado ao grupo de amostras parafinadas. Curiosamente, os dados quantitativos nas amostras de pacientes PB embora apresentem menor n?mero de genomas, tem tamb?m um percentual maior de positividade. A despeito de ajustes necess?rios para melhorar a efici?ncia da rea??o, os resultados nos mostram que o teste pode ser ?til, em especial nos casos inconclusivos e de dif?cil diagn?stico, como nas formas paucibacilares quando o n?mero de genomas for alto (maior que 50) que diminui o risco de falsos positivos.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias da Sa?de}, note = {Faculdade de Medicina} }