@MASTERSTHESIS{ 2021:1326337388,
 	title = {Expressão endógena do hormônio do crescimento de tambaqui (Colossoma macropomum) em Pichia pastoris},
 	year = {2021},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8319",
 	abstract = "Na região norte, onde há o maior consumo de pescado, o tambaqui (Colossoma
 macropomum) é o peixe mais consumido. Para possibilitar o aumento da produção do
 tambaqui, é necessário compreensão sobre a fisiologia, ecologia, dentre outros
 conhecimentos, para uma otimização e padronização de tecnologias a serem
 aplicadas na produção desse peixe. Recentemente, o cDNA do hormônio de
 crescimento de tambaqui foi construído por síntese química e expresso em P. pastoris
 sob o controle do promotor pAOX1 dessa levedura. Considerando a toxicidade do
 indutor deste promotor, este trabalho tem como principal objetivo a expressão
 heteróloga intracelular do hormônio de crescimento de tambaqui (rtGH) na levedura
 Pichia pastoris, utilizando um promotor constitutivo, o pPGK1. Foram construídos dois
 vetores para expressão de rtGH, sendo que esses vetores foram linearizados e
 integrados no genoma de P. pastoris linhagem M12 (auxotrófica para o aminoácido
 leucina). Os clones transformantes foram selecionados inicialmente no meio seletivo
 MD seguido de uma segunda seleção por crescimento em meio MD com o antibiótico
 G418. Para confirmação das colônias transformantes, foi realizado identificação do
 gene rtGH por meio de PCR, enquanto a confirmação da expressão intracelular da
 proteína foi realizada por imunodot e SDS-PAGE/Western Blotting. Como a expressão
 do tGH ocorreu em níveis baixos, esforços deverão ser realizados no sentido de se
 identificar a razão da baixa produção, para que se possa obter a expressão do
 hormônio em níveis em que se possa utilizar a levedura recombinante para
 suplementação de ração para peixes.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ciências Biológicas}
}