@PHDTHESIS{ 2007:1477218957, title = {Bact?rias produtoras de Lipase e aplica??o no processo de DE Hidr?lise do ?leo de Buriti (Mauritia flexuosa L.)}, year = {2007}, url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/3062", abstract = "As ind?strias biotecnol?gicas v?m buscando novos produtos ou realizando mehorias dos processos j? existentes a partir dos recursos gen?ticos dispon?veis. Os avan?os recentes em ?reas como bioss?ntese, rotas metab?licas e evolu??o dirigida de prote?nas, indicam uma troca de paradigma da biologia tradicional para a biotecnol?gica. Esse trabalho apresenta uma sele??o de bact?rias produtoras de lipase visando a aplica??o na hidr?lise de ?leo de buriti. De 440 isolados bacterianos testados, 181 foram selecionados para os testes qualitativos em placas de Petri. Desses, 75 isolados (41%) foram lipase positivos. A atividade enzim?tica foi analisada em diferentes temperaturas (30o, 35o, 40o e 45oC). Ap?s 72 horas de cultivo em meio de cultura indutor contendo ?leo de oliva como substrato, os ?ndices enzim?ticos foram avaliados atrav?s da rela??o entre o di?metro do halo ao redor da col?nia e o di?metro da col?nia. Aos 30oC houve a maior atividade enzim?tica, servindo assim como temperatura chave para a sele??o. Os isolados foram classificados em diferentes categorias conforme a atividade enzim?tica e comparados com uma estirpe padr?o. Assim, vinte e quatro foram selecionados para os testes quantitativos. Desses, foi poss?vel selecionar seis isolados bacterianos (INPA P-106; INPA P-108; INPA P-124; INPA P-798; INPA P-803 e INPA P-799). N?o houve diferen?as significativas entre esses seis e todos foram selecionados para os testes de hidr?lise enzim?tica do ?leo de buriti. A bact?ria selecionada (INPA P-798) apresentou a melhor afinidade ao ?leo de buriti e o seu rendimento com a enzima precipitada (em % de ?cidos graxos liberados) foi superior ao da sua lipase purificada e do seu extrato bruto. A enzima purificada apresentou atividade ?tima a 55?C e em pH 8,5. O CaCl2 e ZnSO4 promoveram o aumento da atividade em 22% e 18%, respectivamente, e o MgSO4 reduziu a atividade em 13%. Nos ensaios com diferentes concentra??es de substrato, a enzima obteve um valor de Vmax = 12500 ?M p-NP.mL-1 e Km = 1,125 ?M p- NP.min-1. Das seis bact?rias selecionadas, quatro pertecem ao g?nero Burkholderia, uma ao g?nero Klebsiella e uma n?o foi identificada ao n?vel de esp?cie. A bact?ria selecionada (INPA P-798) pertence ? esp?cie Burkholderia cepacia , uma cl?ssica produtora de lipase.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }