@PHDTHESIS{ 2013:1340275579, title = {Avalia??o dos processos de produ??o de protease fibrinolitica por fermenta??o submersa, semi-s?lida e extrativa utilizando uma esp?cie de bacilo da Amaz?nia}, year = {2013}, url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/3082", abstract = "As proteases fibrinol?ticas degradam co?gulos de fibrina, por isso t?m um importante papel na ind?stria farmac?utica como agentes quimioterap?uticos no tratamento de doen?as cardiovasculares. Estes biocatalisadores foram descobertos gradualmente a partir de plantas, insetos, anel?deos, serpentes e micro-organismos (bact?rias e fungos). Doen?as cardiovasculares tem sido a principal causa de morte no mundo. Uma das principais causas de doen?as card?acas ? o ac?mulo de fibrina nas art?rias, acarretando trombose. De acordo com Organiza??o Mundial da Sa?de (OMS), cerca de 17,5 milh?es de pessoas morrer?o este ano de doen?as cardiovasculares, e em 2030, esse montante ser? de 23,6 milh?es. Tendo em vista o grande potencial da biodiversidade microbiana regional Amaz?nica e a crescente aplicabilidade de enzimas na produ??o de medicamentos, esta pesquisa foi realizada com o objetivo de (1) avaliar o crescimento de Bacillus stearothermophilus, (2) estabelecer os par?metros de crescimento associado a produ??o de proteases fibrinol?ticas por fermenta??o submersa e (3) verifica o efeito da fermenta??o extrativa na separa??o dessas enzimas. Neste estudo foram empregados t?cnicas de fermenta??o extrativa e fermenta??o semi-s?lida. Por fermenta??o submersa foram determinados os seguintes par?metros: Perfil do crescimento de Bacillus stearothermophilus e a produ??o de protease utilizando 100mL do meio l?quido [(g/L) KH2PO4 2g; (NH4)2SO4 1g; MgSO4 7H2O 0,1 g; Na2HPO4 2H2O 0,9 g; Extrato de Levedura 1 g; ?gua destilada 1000mL] pH 7,2 suplementado com gelatina 0,5%, em frasco de Erlenmeyer de 500mL. O crescimento da bact?ria foi determinado a 610nm, de 2 em 2 horas, durante 36 horas. Na Determina??o das melhores condi??es para produ??o de proteases foram avaliados a influ?ncia do pH; agita??o, temperatura, a idade do in?culo, da concentra??o do substrato, a influ?ncia das fontes de naturais de carbono (tapiocas, araruta e crueira), fontes de nitrog?nio e aera??o. No extrato recuperado foi realizado tamb?m bioensaio de toxicidade em Artemia salina e testes de degrada??o in vitro do co?gulo sangu?neo pelos m?todos da placa de fibrina e degrada??o do coagulo artificial em tubo. Foi determinado tamb?m o coeficiente de parti??o (K), o fator de purifica??o (FP) e a recupera??o da enzima. A fermenta??o semi-s?lida foi realizada utilizando como substrato 10g feij?o manteiginha [Vigna unguiculata (L.) Walp], com 60% umidade, pH 5,0 em frasco Erlenmeyers de 250 mL. Na fermenta??o extrativa as melhores condi??es foram: pH 5,0; 180 rpm e 25 ?C, no sistemas utilizaram PEG 1000 (g/mol-1) a 20% (p/p) e sais fosfato a 15% (p/p) com K de 1,05; FP de 1,00; Y de 152,54. Halo de 34 mm na placa de fibrina e degrada??o parcial do coagulo em tubo. Na fermenta??o semi-s?lida a produ??o de protease foi de 8,87 (U/mL), halo translucido de 23 mm em placa de fibrina com degrada??o total do coagulo de sangue em 24h. No presente estudo, protease de Bacillus stearothermophilus produzido em fermenta??o extrativa e fermenta??o semi-s?lida foi avaliada, demonstrando nas condi??es ?timas de cultivo que este micro-organismo apresenta fisiologia para aplica??es industriais na produ??o de protease fibrinol?tica", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }