@PHDTHESIS{ 2008:1290146207, title = {Diversidade gen?tica de isolados de Botryosphaeria rhodina produtores de jasmonatos}, year = {2008}, url = "http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5871", abstract = "Os microrganismos produzem subst?ncias qu?micas como resultado do metabolismo prim?rio e secund?rio. No metabolismo secund?rio est?o envolvidas vias metab?licas para a s?ntese de produtos naturais que n?o s?o essenciais para o crescimento do organismo produtor. O fungo Botryosphaeria rhodina, tem despertado um interesse crescente devido ? produ??o de uma serie de ?cidos graxos ciclopentanos, do tipo ?cido jasm?nico (AJ), com propriedades reguladoras do crescimento de plantas superiores. Usualmente o AJ ? um regulador de crescimento vegetal end?geno, sintetizado de maneira natural por uma grande variedade de plantas, pertence aos reguladores de crescimento vegetal (RCV) denominados jasmonatos, sendo os mais representativos o ?cido (-)-jasm?nico (-)-AJ e o ?cido(+)-7-isojasm?nico [(+)-7-isoAJ] os quais se encontram amplamente distribu?dos nas plantas. AJ tem in?meras aplica??es conhecidas tais como a utiliza??o do AJ na fabrica??o de perfumes; na produ??o do ch? preto; na redu??o do consumo de estimulador de crescimento; na produ??o de malte em ind?strias de cerveja; no aumento da produ??o de taxol; na produ??o de flavorizantes aliment?cios, entre outros. Os microrganismos produzem subst?ncias qu?micas como resultado do metabolismo prim?rio e secund?rio. No metabolismo secund?rio est?o envolvidas vias metab?licas para a s?ntese de produtos naturais que n?o s?o essenciais para o crescimento do organismo produtor. O fungo B. rhodina, tem despertado um interesse crescente devido ? produ??o de uma serie de ?cidos graxos ciclopentanos, do tipo AJ, com propriedades reguladoras do crescimento de plantas superiores. A import?ncia crescente do uso de microrganismos na biotecnologia nos levou a propor a prospec??o dos metab?litos produzidos pelos microrganismos existentes em esp?cies vegetais da Amaz?nia. Desse modo, foram obtidos isolados de B. rhodina capazes de produzir o ?cido jasm?nico e seus derivados os quais foram caracterizados geneticamente por meio de seq?enciamento do DNA ribossomal e pela t?cnica de AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism ou Polimorfismo de Comprimento de Fragmentos Amplificados). Trinta e quatro linhagens de B. rhodina isoladas como pat?genos de plantas tropicais, tais como: citros, manga, mogno africano, mam?o, cupua?u e madeira cortada foram analisadas para verificar a capacidade de produ??o de AJ utilizando-se a metodologia de Miersch et al., 1989. Os ensaios para produ??o de AJ e seus derivados foram realizados em meio Miersch (M1) e Miersch Modificado (M2) e, avaliados em placas de Cromatografia em camada delgada comparativa (CCDC) e quantificados por meio de Cromatografia l?quida de alta efici?ncia (CLAE). Ap?s a avalia??o da produ??o de jasmonatos as linhagens foram submetidas ? an?lise molecular de regi?es ITS do rDNA para avalia??o da diversidade gen?tica. A extra??o do DNA foi realizada por m?todos cl?ssicos, seguido da amplifica??o das regi?es conservadas ITS do rDNA por meio da t?cnica de PCR, onde foram utilizados os oligonucleot?deos ITS1 e ITS4. A dist?ncia gen?tica entre as linhagens variou de 0 a 1,6%. A taxa de transi??o/transvers?o foi de 1,2. Os alinhamentos foram submetidos ainda ao Programa TCS, resultando na identifica??o de nove hapl?tipos e 10 s?tios polim?rficos. A matriz de dist?ncia gen?tica assim como a ?rvore filogen?tica resultante mostrou pouca diverg?ncia gen?tica nas regi?es de DNA analisadas. Tamb?m foi feita a analise das linhagens de B. rhodina por meio de marcadores moleculares AFLP. Para a obten??o dos resultados foram utilizadas quatro combina??es de iniciadores nas rea??es AFLP, possibilitando a gera??o de 300 marcadores polim?rficos. O n?mero m?dio de bandas obtidas por iniciador foi de 79% e a porcentagem de bandas polim?ficas foi de 95%. A dist?ncia gen?tica entre as linhagens de B. rhodina foi de 29,19%, e a porcentagem de loci polim?rfico foi de 0,95%. Todas as linhagens investigadas foram agrupadas em quatro grupos e foram obtidos indicadores de alta variabilidade gen?tica entre todos os isolados.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }