@PHDTHESIS{ 2017:1323009051,
 	title = {Fosfolipase A2-Asp-49 DE Bothrops jararacussu encapsulada em lipossomas como terapia alternativa para leishmaniose cut?nea},
 	year = {2017},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6298",
 	abstract = "A leishmaniose cut?nea ? uma doen?a end?mica em v?rias regi?es do mundo. No Brasil, 75% dos pacientes com a doen?a exibem uma forma cl?nica t?pica, caracterizada por uma ou mais ?lceras de bordas redondas e elevadas com um centro necr?tico. Leishmania amazonensis ? um dos principais agentes etiol?gicos de formas cl?nicas da leishmaniose. O objetivo do presente trabalho foi o de investigar os efeitos in vitro e in vivo da potencial atividade antileishmania amazonensis da Fosfolipase A2 (PLA2) da pe?onha de Bothrops jararacussu encapsulada em sistema lipossomal. O m?todo de MTT foi utilizado para avalia??o da citotoxicidade da PLA2-Asp49-lipossomal em macr?fagos J774 ap?s 48h de incuba??o. Os macr?fagos tratados com a PLA2-Asp49-lipossomal apresentaram viabilidade celular em cerca de 82% na maior concentra??o utilizada (100 ?g/mL). No ensaio com as formas promastigotas tratadas com a mesma concentra??o da PLA2-Asp49-lipossomal ocorreu uma inibi??o de 78% dos parasitos. Para o teste de infec??o macr?fagos peritoneais de camundongos Balb/c, infectados e incubados com PLA2-Asp49-lipossomal apresentaram redu??o de 28% no ?ndice fagoc?tico e de 55% (p < 0.05) na quantidade de amastigotas intracelulares, ap?s 48h de tratamento, comparado ao grupo controle. Os sobrenadantes de cultura dos macr?fagos peritoneais foram coletados para a avalia??o da produ??o de citocinas (TNF-? e IL-10) e de ?xido n?trico. N?o houve produ??o de IL-10 pelos macr?fagos tratados com o PLA2-Asp49-lipossomal in vitro. Entretanto, o grupo tratado com PLA2-Asp49-liposomal produziu n?veis significativos de TNF-? e ?xido n?trico. Ap?s a caracteriza??o f?sico-qu?mica dos lipossomas foi observado que o tamanho das ves?culas permaneceu pr?ximo ao tamanho da membrana utilizada na extrus?o, com di?metro m?dio entre 205,2 nm para PLA2-Asp49-liposomal e 241,9 nm para os lipossomas controle. A PLA2-Asp49 foi eficientemente encapsulada nos lipossomas (69,6%). A atividade dos lipossomas contendo a toxina foi avaliada em camundongos BALB/c, previamente infectados com 1x105 promastigotas do parasito. Ap?s seis semanas foi iniciado o tratamento com as prepara??es dos diferentes grupos de animais, acompanhados por 21 dias. Foi observado nos animais tratados com PLA2-Asp49-lipossomal diminui??o de aproximadamente 18% do tamanho da les?o das patas, em rela??o ao grupo controle sem tratamento e aos animais tratados com o f?rmaco refer?ncia (Glucantime?). Ao t?rmino do tratamento, os animais foram mortos, os tecidos das patas e linfonodos foram coletados para recupera??o de amastigotas e quantifica??o de citocinas e nitritos nos sobrenadantes destes tecidos. No macerado do linfonodo, no grupo tratado com PLA2-asp49-liposomal observou-se redu??o da carga parasit?ria de 73,5%, comparado com o grupo controle. Ainda nessa compara??o, no macerado do tecido da pata houve redu??o de 57,12% dos n?meros de amatigotas transfomadas para promastigotas. Os grupos infectados e tratados com PLA2-Asp49-lipossomal apresentaram aumentos significativos, respectivamente, nos tecidos dos linfonodos e patas, nos n?veis de IL-12 (1.200 e 400 pg/mL), fator de necrose tumoral (TNF-?) (50 e 100 pg/mL), e de nitritos (32 e 36 ?M), quando comparados aos grupos infectados e sem tratamento. Os resultados sugerem que o sistema lipossomal contendo PLA2-Asp-49 ? uma ferramenta biotecnol?gica promissora para conferir atividade antileishmania a macr?fagos infectados, aumentando seus mecanismos celulares microbicidas e auxiliando para o estabelecimento de uma resposta imunol?gica mais eficiente.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas - Universidade Federal de Rond?nia},
 	scholl = {Programa de P?s-gradua??o em Biodiversidade e Biotecnologia da Amaz?nia Legal - BIONORTE},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}