@MASTERSTHESIS{ 2018:1806008984, title = {Avalia??o da resposta humoral estimulada por probi?tico contendo a 'Prote?na 1' de Superf?cie De Merozo?to de Plasmodium falciparum (pf-MSP1-19)}, year = {2018}, url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6856", abstract = "Bacillus subtilis ? uma bact?ria Gram-positiva, n?o patog?nica, que recebeu o status GRAS (Generally Regarded As Safe) pelo FDA Americano. Quando exposta ? situa??o adversa o B. subtilis produz um tipo de c?lula morfologicamente distinta, denominada de esporo. Pesquisas t?m destacado o potencial do uso de esporos como delivery vacinal, sendo estes capazes de estimular respostas imunes sist?micas e localizadas, promovendo ainda eleva??o da resposta humoral quando coadministrado com ant?genos acoplados ou integrados ? superf?cie dos esporos. Atualmente, ainda n?o h? uma vacina eficaz para o combate ? mal?ria e dentre os ant?genos estudados, a prote?na Pf-MSP1-19 de Plasmodium falciparum se mostra um dos mais promissores e elucidados candidatos vacinais. Diante do exposto, este trabalho teve como objetivo principal avaliar a resposta imune frente ao ant?geno rPf-MSP1-19 de Plasmodium falciparum, presente na superf?cie dos esporos de Bacillus subtillis. Materiais e m?todos: Para isso, foram realizados separa??o por renografina e quantifica??o por citometria de fluxo dos esporos de Bacillus subtillis recombinados com rPf-MSP1-19 e esporos Wild Type (WT), seguido pelo acoplamento qu?mico da rPf-MSP1-19 ? superf?cie dos esporos WT autoclavados. Com as ferramentas produzidas, camundongos Balb/c foram imunizados via oral e intraperitoneal e os soros obtidos avaliados por ELISA indireto. Resultados: Neste trabalho o acoplamento qu?mico utilizando EDC e NHS se mostrou o melhor m?todo para adsor??o da prote?na rPf-MSP1-19 ? superf?cie de esporos. Uma nova abordagem para quantifica??o de esporos foi aplicada usando Citometria de Fluxo e Beads Trucount? demonstrando maior potencial de efici?ncia e sensibilidade. Foi observado que houve a degrada??o da prote?na rPfMSP1-19 quando expressa diretamente na superf?cie do esporo, pelo m?todo recombinante. Quanto as imuniza??es orais, n?o foi poss?vel obter resposta imune frente ao ant?geno acoplados aos esporos quimicamente e nem a Bacillus subtillis recombinante. Entretanto as imuniza??es intraperitoneais induziram n?veis elevados de IgG anti- rPf-MSP1-19 no grupo imunizado com rPf-MSP1-19 acoplada ? superf?cie dos esporos WT autoclavados semelhante ao controle positivo. Sugerindo o uso de esporos de B. subtilis Wild Type autoclavados como alternativa de delivery e de adjuvante de ant?genos para imuniza??es com fins experimentais, podendo no futuro ser aplicado em imuniza??es em humanos.", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas} }