@MASTERSTHESIS{ 2015:194496159,
 	title = {Clonagem e express?o da enzima beta-glucosidase recombinante do fungo Aspergillus niger em Pichia pastoris},
 	year = {2015},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6959",
 	abstract = "As enzimas celulol?ticas s?o produzidas por uma diversidade de microrganismos. Contudo, a grande maioria apresenta grandes restri??es que dificultam ou que oneram o processo de produ??o das enzimas. Al?m disso, grande parte dos cons?rcios enzim?ticos comerciais dispon?veis, apesar de apresentarem os tr?s grupos de celulases (Endoglucanases, Celobiohidrolase, ?-glucosidase) para a completa degrada??o da celulose, possuem uma baixa atividade ?-glucosid?sica. Deste modo, gera necessidade de suplementa??o desta enzima a estes preparados enzim?ticos. Para resolver estas restri??es, a biologia molecular aliada ? tecnologia do DNA recombinante se configura como uma ferramenta favor?vel na produ??o enzim?tica, viabilizando a express?o apenas das enzimas de interesse, minimizando ou eliminando a produ??o de prote?nas interferentes. Neste contexto, a produ??o de ?-glucosidase recombinante por microrganismo geneticamente modificado Pichia pastoris, se configura como um grande passo para obten??o dessa enzima com uma produ??o economicamente vi?vel e com grande potencial para aplica??o na industrial. Portanto, ?-glucosidases recombinantes s?o potenciais ferramentas na produ??o de bioetanol, e no futuro pr?ximo, pode ser bem-sucedida no cumprimento dos requisitos de fontes alternativas e renov?veis de energia. De acordo com a crescente import?ncia da ?-glucosidase em diversas aplica??es, o presente trabalho teve como objetivo clonar e expressar a enzima ?-glucosidase recombinante de Aspergillus niger na levedura metilotr?fica P. pastoris. Conforme os resultados obtidos, foi poss?vel demonstrar que a enzima ?-glucosidase de A. niger foi expressa eficientemente na levedura P. pastoris, assim como, a sua secre??o no sobrenadante da cultura celular conforme an?lise de imunodetec??o Colony Blotting. Baseado no perfil eletrofor?tico em gel SDS-PAGE dos tempos de indu??o da produ??o de ?-glucosidase dos clones recombinantes Mut+ (46) e clone Muts (22), a indu??o em meio liquido dos clones recombinantes foi realizada com sucesso devido ? apresenta??o da banda correspondente a enzima ?- glucosidase com massa molecular de aproximadamente 103 kDa. No clone Mut+ o melhor tempo de indu??o para express?o da prote?na recombinante foi o tempo de 72 horas, no clone Muts os melhores tempos foram 72 horas e 96 horas. Portanto, a atividade ?-glucosid?sica do clone recombinante Muts foi de 12.517,33 U. L-1.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}