@MASTERSTHESIS{ 2019:1213039371,
 	title = {Clonagem e express?o da enzima ?-glucuronidase obtida de uma biblioteca metagen?mica de terra preta de ?ndio},
 	year = {2019},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7720",
 	abstract = "As enzimas est?o presentes em todas as c?lulas vivas, onde atuam como catalisadoras biol?gicas no controle metab?lico de todos os organismos vivos. Os microrganismos ganham cada vez mais destaque como produtor dessas mol?culas biocatalizadoras. A t?cnica metagen?mica utilizando ferramentas moleculares e da bioinform?tica torna poss?vel descobrir novas enzimas a partir de uma amostra ambiental qualquer. A Terra Preta de ?ndio ? encontrada em algumas regi?es da Amaz?nia, apresentando alto teor de mat?ria org?nica devido ? alta atividade biol?gica neste ambiente. A partir de uma biblioteca metagen?mica de Terra Preta de ?ndio constru?da e depositada na Universidade Federal do Amazonas, foi poss?vel identificar um grupo de enzimas hidrolases. Dentro deste grupo foi rastreada a enzima ?-glucuronidase que tem papel fundamental no metabolismo bacteriano, como gene rep?rter em transforma??o de plantas, em teste antidoping e na biotransforma??o da mol?cula de glicirrizina em derivados que agrega maior valor econ?mico para ind?stria farmac?utica e cosm?tica. A ?-glucuronidase foi clonada e expressa em E coli. BL21(DE3) pLysS utilizando como vetor o plasm?deo pET28a(+) Promega. Sua massa molecular foi estimada em 61 kDa. Sua atividade catal?tica em tamp?o fosfato de s?dio 100mM utilizando como substrato X-gal (20 mg/mL) (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-?-D-galactopiranos?deo) foi melhor a 40 oC e pH 7. Com par?metros cin?ticos aparentes Km e Vmax 4,08 mg e 0,45 mn.min-1 respectivamente. Os resultados deste projeto ir?o contribuir para o melhor estudo da capacidade catal?tica, comparar sua capacidade hidrol?tica com outras ?-glucuronidases comerciais e desta forma torn?-la mais adequada para aplica??o em diferentes ramos biotecnol?gicos.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas}
}